高效液相色谱柱特点介绍
液相色谱柱是按照严格的标准生产和测试的。如果能按照以下信息使用和维护色谱柱，不仅可以获得更好的测试结果，而且可以延长色谱柱的使用寿命。
有必要了解更多关于所用样品的信息，例如结构、分子量、酸碱度、极性等。当您要选择色谱柱时。
1、如果样品是极性弱酸性的，我们可以选择C18 HPLC色谱柱在100%酸性水溶液条件下检测，即选择保留好的极性化合物并能承受100%纯水的色谱柱。
2、可选择CN、NH2或硅胶柱、HILIC（亲水色谱），如果样品极性过强或酸性过强，也可以使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换柱。（问题是离子对试剂平衡需要很长时间，需要更精 确的流动相pH值。否则重复实验会很困难。更糟糕的是，很难洗掉离子对试剂。一般情况下，对于使用离子对的色谱柱，不适合用于其他实验）。
3、如果碱性化合物极性太强，或者碱性太强，可以选择宽pH C18柱在高pH值下检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实施该技术的色谱柱品牌较少，价格较高）或使用HILIC色谱柱（硅胶柱在反相条件下使用，也是一种非常经典的检测碱性样品的方法）。选择强离子交换柱，不适合分析其他样品。相对pH要求更精 确，否则难以重复实验。也可使用 C18+ 强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。
4、如果样品呈碱性，选择高纯硅胶柱（高纯硅胶不含金属杂质，硅胶端基被封闭）或一些改良的C18柱。它们会减少碱性化合物的拖尾，一般选择在中性或偏碱性条件下进行，因为这样可以增加碱性样品的保留。
反相高效液相色谱柱的主要功能和物理性质
反相高效液相色谱柱以其分离效率高、选择性好、检测灵敏度高、操作自动化、应用范围广等优点成为广大分析人员的首 选分析方法。流动相在液相分离中起着重要作用，是液相色谱柱系统的大脑。能否选择合适的流动相会影响整个分析的质量。掌握流动相选择的理论知识对于分析人员，尤其是药 物分析人员来说是非常有必要的。
选择合适的流动相进行分析是一项艰巨且非常艰巨的任务。尽管没有关于流动相选择的简单技巧、捷径或秘密，但有一些理论可以简化这个过程。反相HPLC的流动相一般由水相和有机相组成。
反相 HPLC 色谱柱的物理特性
硅胶纯度：硅胶纯度对于强极性化合物的分离更为重要。残留的金属离子浓度和二氧化硅杂质会影响化合物的峰形。硅胶表面金属含量高会影响碱性化合物的峰形，容易出现拖尾现象。
A型硅胶由金属硅酸盐制成，硅胶金属含量高，纯度低，可用于中性化合物和非离子化合物的分离。
B型硅胶采用无金属工艺制备，纯度高，酸性弱，仅含少量金属。可用于分离离子化合物、可电离化合物，尤其是碱性化合物。
目前的色谱柱填料主要是B型硅胶，但不同品牌、型号的色谱柱硅胶表面金属含量仍略有差异。如果色谱峰形较差，则需要注意不同品牌色谱柱的硅胶纯度。
色谱柱尺寸：增加色谱柱的长度可以在一定程度上提高柱效，但也会增加压力，导致峰展宽；较宽的柱径会增加上样量，但也会增加横向扩散，这也会导致峰展宽。窄柱径可节省溶剂，减少横向扩散，但压力较高，系统要求较高。
