HPLC柱的工作温度、保护和再生

HPLC柱温控

在高效液相色谱仪中，需要高效液相色谱柱和一些检测器来精 确控制工作环境的温度，对色谱柱恒温的要求非常高。温度对溶剂的溶解度、HPLC 色谱柱的性能和流动相的粘度都有影响。一般来说，升高温度可以增加溶质在流动相中的溶解度，从而降低其分配系数，但对分离选择性影响不大；它还可以降低流动相的粘度，从而改善传质过程，降低柱压。但是，如果温度过高，则容易在流动相中造成气泡。

HPLC柱温变化

不同的探测器对温度的敏感度不同。HPLC柱的不同工作温度对保留时间和相对保留时间有影响。在凝胶色谱中使用软填料时，温度会引起填料结构的变化，从而影响分离。但是，如果使用硬填料，效果并不显着。

高效液相色谱柱的保护和再生

在色谱分析系统中，高效液相色谱柱主要起到分离和检测物质的作用，如色谱系统的心脏，也是易损产品。一些保留值较小的物质，如盐类，更容易被冲入色谱柱，而另一些保留值较强的物质，流动相溶液不足以洗脱这些物质。

在多次取样后，这些吸附在柱子表面的物质通常会积聚在柱头中。当吸附的样品组分积累到一定程度时，就会形成新的固定相，改变分离机理，使样品保留时间发生波动，出现拖尾现象。

为延长色谱柱的使用寿命，曾有人指出应在分析柱前接小保护柱。作用是收集和阻挡来自进样器的机械和化学杂质，以保护和延长分析柱的使用寿命。

因此，选择保护柱的原则是在满足分离要求的前提下，尽可能选择分离样品保留率低的短保护柱。