气相色谱(GC)用户对于进水功能有很多疑问。以下四个主要问题:
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水会溶解 GC 固定相吗?
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水会粘附在 GC 柱上吗?
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水样是否与 GC 进样口不兼容?
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气相色谱相的水润湿性如何?
被这些谣言迷惑了吗?想知道真相吗?继续阅读!
1.水会溶解GC固定相吗?
这种说法既正确又错误!如今,大多数毛细管相都可以注入水,因为这些相与二氧化硅发生了交联。事实上,所有Zebron聚二甲基硅氧烷 (PDMS) 和聚乙二醇 (PEG) 相都通过以下方式发生交联:
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PDMS 相的 OH 或 O-CH3 封端
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用于 PEG 相的 CO-Si
得益于这种工程自交联技术 (ESC),下面 MacReynolds 标度中表示的所有柱子都不会发生相溶解。
相反,老一代固定相只是简单地涂覆在色谱柱上,并没有发生交联。这种情况主要出现在填充气相色谱柱和第1根毛细管气相色谱柱中。
图 1. GC 固定相的 MacReynolds 分类
2. 水会粘附在 GC 柱上吗?
回到气相色谱原理,如果柱温足够高(>120 °C),水很容易从色谱柱中洗脱出来。这适用于上述MacReynolds等级中提到的所有气相色谱毛细管柱,除了ZB-WAX™。
事实上,WAX色谱柱相是由 PEG 聚合物制成的,它会与水形成强的氢键相互作用。在一次又一次的进样过程中,水分子会吸附并积聚在相上,从而逐渐改变色谱柱的选择性。此外,如果相交联不当,未交联的相会在连续进水过程中析出。因此,保留时间会发生变化,方法也无法重现。
图2. 氢键相互作用
如果 PEG 相*适合您的选择性,那么还有一种适合您的水相样品的解决方案——ZB-WAXPlus。这款 ZB-WAX 的替代品具有相似的选择性,但其键合工艺使其在水相基质的重复进样中具有卓 越的稳定性。多次或常规进样不会随着时间的推移改变相的效率或极性。它适用于许多水溶性化合物,例如酒精饮料或乙二醇样品中的化合物。
3. 水样是否与 GC 进样口不兼容?
虽然水样与 GC 进样口兼容,但由于水的膨胀体积非常重要,因此必须采取特殊的预防措施。
例如,1.0µL二氯甲烷在200°C进样口和10psi压头下膨胀体积仅为361µL。在相同条件下,1.0µL水膨胀体积为1279µL。
考虑到衬管具有特定的体积,必须考虑其较大的膨胀体积。事实上,如果膨胀体积大于衬管体积,蒸汽可能会反冲到未加热的供气管路中,导致持续的样品残留。因此,对于水,建议使用较小的进样量。
事实上,标准的Z-liner规格为长度78.5mm、内径4mm,因此其有效容积为493µL,这个容积太小,不足以容纳上述条件下的水蒸气云。
4. 气相色谱固定相的水润湿性如何?
没错!与大多数市售的WCOT固定相相反,水具有非常高的表面能。因此,水的润湿性非常差。色谱柱制造过程中的失活工艺会降低固定相的表面能。因此,虽然可以增强润湿性,但代价是惰性非常低,从而无法为活性化合物提供较大的峰。
由于水的沸点高,不能很好地润湿相,一些水*终会通过色谱柱而不被蒸发,导致高水溶性化合物的峰分裂和谱带增宽。
关于气相色谱与水不兼容的谬论由来已久,源于旧的色谱柱技术,这些色谱柱采用涂层而非化学键合。Phenomenex 只生产与水兼容的化学键合色谱柱。唯 一的例外是 ZB-WAX,它在用于水样后重现性较差。在这种情况下,应考虑其水兼容版本 (ZB-WAXplus)。
大多数与注水相关的问题实际上源于体积膨胀,从而产生回火。降低注射量和注射温度有助于解决这个问题。