氨基（NH2）柱：如何保持高性能？

氨基(NH2)柱使用一段时间后，是否遇到柱效降低、柱压升高？或干扰峰异常、保留时间漂移？或某些色谱下方法无法重现条件？还是分辨率、塔板、拖尾因子达不到检测要求？NH2柱的独特性给我们带来了很多麻烦，所以今天我们就来聊聊NH2柱。

NH2柱的键合官能团是氨基丙基，比传统的C18、C8和C4更容易水解。因此，在使用NH2柱之前，我们必须有一个心理准备，NH2柱的寿命比常规柱要短很多。

NH2 柱可用作正相或反相。由于两相中使用的溶剂不混溶，因此需要使用异丙醇进行过渡以在正相和反相之间切换。下面分别讨论反相和正相NH2柱的使用和维护。

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反相

如果流动相中不含任何酸、碱或盐，则样品检测后应用 100% 乙腈冲洗并保存 NH2 柱。如果流动相含有酸、碱或盐类，先用 60% 乙腈冲洗色谱柱 40 分钟，然后用 100% 乙腈冲洗并储存。

反相使用时，注意流动相的pH范围。pH值越低，水解越容易。理想的 pH 值范围是 3-7。此外，流动相中水的比例越高，水解越容易。

使用后，建议将色谱柱冲洗并存放在纯有机相中，以获得良好的保存效果并延长使用寿命。另外，如果色谱柱出现高压、峰形异常、柱效低或分离度低等异常情况，可先用过渡流动相冲掉盐分，然后按如下方式冲刷：100%乙腈→100%甲醇→100%异丙醇→ 100% 乙腈以分析流速每步 30 分钟，而异丙醇由于其高粘度需要较低的流速。

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正常阶段

色谱柱应用100%正己烷冲洗，并用正己烷/异丙醇 (90/10)储存。

在正相模式下，固定相的含水量是影响选择性的关键参数，而流动相的含水量影响保留时间和分离度，因此当固定相和固定相的含水量之间时，保留时间很容易发生偏移。流动相变化。建议去除氨基柱中的水。

建议：

1、去除固定相中的水：
      用30倍柱体积的含有 2.5% 二甲氧基丙烷和 2.5% 冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱。

  2、使用控制水含量的流动相

半饱和流动相法：将无水非极性流动相分成两半。 一半加入一定量的水，然后混合搅拌约1小时。 静态分层后，除去多余的水相，将两半重新混合在一起形成“半饱和”流动相。

如果色谱柱出现高压、峰形异常、柱效低或分离度低等异常情况，请按以下步骤冲洗色谱柱：100% 异丙醇 → 100% 甲醇 → 100% 异丙醇，分析流速每步 40 分钟，而异丙醇由于其高粘度，需要较低的流速。