由于可电离化合物的保留对流动相 pH 值非常敏感,因此必须通过添加缓冲液来控制流动相的 pH 值。 添加少量酸或碱时,缓冲液可保持 pH 值。 许多不同的物质已用于 HPLC 中的缓冲。
用于带 UV 检测的 HPLC 的zui常用缓冲液是磷酸盐和醋酸盐。 磷酸盐和醋酸盐是特别有用的缓冲液,因为它们可以在低于 220 nm 的波长下使用。
当质谱仪用作 LC 检测器 (LC-MS) 时,流动相必须是挥发性的,因为 LC-MS 接口的功能之一是使流动相汽化。 这意味着不能使用zui常用的 LC-UV 工作缓冲液磷酸盐。 几种缓冲液的挥发性足以满足 LC-MS 使用的要求。 LC-MS 应用中zui常见的 HPLC 缓冲液是醋酸盐、TFA (0.1%)、甲酸、甲酸铵和碳酸氢铵。
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