当您结束了一 天的工作并关闭仪器时,您可能会问自己:“将色谱柱储存在适当的流动相条件下真的有必要吗?它可能会在测试结束时增加一个额外的步骤,或者直到您回家后才忘记的事情,但简短的回答是肯定的,色谱柱存储确实很重要。
就像选择合适的流动相用于特定色谱柱相可以优化色谱柱的使用寿命一样,在测试后适当储存色谱柱的流动相也可以延长色谱柱的使用寿命。在下面的示例中,您可以看到相同的方法和分析物对相同类型色谱柱的不同批次进行分析。
图1.第1列色谱图
图2.第2列色谱图
图3.第3列色谱图
分析物
第1列(图1)
第2列(图2)
第3列(图3)
Methionine
1.05
1.02
0.91
Homocysteine
1.17
1.14
1.03
Homocysteine-D3
1.16
1.13
Cysteine
1.60
1.59
1.4
图1是在适当的条件下存储的较新色谱柱。后两个是以前在整个实验室中发现的较旧的色谱柱。虽然图1和图2中的色谱图显示保留时间相似,但根据峰形,该色谱柱可能在错误的条件下储存。查看图1和图3时,不仅峰形大不相同,而且保留率也发生了变化。这清楚地表明该色谱柱未在推荐条件下存储。所有三根色谱柱的保留时间见表1。
如果您在实验室中找到一根旧色谱柱并将其扔到仪器上以测试相同色谱柱类型不同批次的保留时间,您可能会在旧色谱柱上看到截然不同的保留时间。这可能是因为该色谱柱在很多很多月前被扔进抽屉之前没有正确存放。但是,如果储存得当,色谱柱可以使用很长时间。
如果您要将色谱柱存放较长时间,大多数制造商建议使用适当的流动相储存色谱柱,但zui好在每天测试结束时使用。应冲洗色谱柱以去除任何缓冲、酸性或碱性成分。为此,用与zui近使用的流动相相同但不含任何缓冲、酸性或碱性组分的溶剂冲洗色谱柱。让它冲洗10-20个色谱柱体积的色谱柱。对于反相色谱柱,制造商建议储存在甲醇或乙腈的某种混合物中,zui多含50%的水。但是,正相色谱柱应储存在非极性溶剂中,例如100%乙腈。
同样重要的是要确保色谱柱被堵塞,并且塞子是紧密的,这样色谱柱就不会变干。色谱柱也应存储在 15-30℃之间
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