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如何正确清理你的HPLC色谱柱


清洁 HPLC 色谱柱的正确方法


我们都知道高效液相色谱柱有一个有限的生命周期，即使经过良好的清理和储存，它们也将达到其生命周期的终点。但是，您可以采取某些措施来zui大限度地延长色谱柱的使用寿命。

如何正确清理你的HPLC色谱柱
我们所有的 HPLC 色谱柱都使用运输溶剂运送给您。对于反相色谱柱，这通常由某种有机物（乙腈或甲醇）和水组成。对于此类色谱柱，在安装之前，您可以用流动相冲洗溶剂管线，安装新色谱柱，用流动相调节色谱柱，然后您就可以开始分析了。

对于在反相和正相条件下运行的色谱柱，您需要注意运输溶剂并确认您的流动相溶剂与运输溶剂混溶/兼容。如果没有，您需要使用溶剂切换程序.

准备好使用 HPLC 色谱柱后，您可以  通过安装在线过滤器、捕集柱来帮助保持其完整性,和一个保护柱。这些将有助于防止污染物损坏您的 HPLC 分析柱。然而，当污染确实积累时，有几种方法可以对抗它。

清洗 HPLC 色谱柱
使用色谱柱后，始终建议在存放前清洁色谱柱。清洗程序通常涉及使用zui接近色谱柱上zui后一个溶剂系统的等度/梯度清洗,但用 HPLC 级水代替缓冲液。这将确保从色谱柱中去除缓冲液成分。然后，您可以增加洗涤中的有机物百分比，以进一步去除任何疏水性杂质。

反冲洗 HPLC 色谱柱
如果您发现峰形变差并伴随反压增加，建议对色谱柱进行反向冲洗。在反向冲洗之前，重要的是要确保您的流动相或柱内溶剂与您的清洗溶剂混溶，并且您的流速不超过色谱柱典型推荐流速的一半。详细程序,按照我们的说明色谱柱保养指南. 您可以使用以下公式确定色谱柱体积： V = pr2L 其中 V 是以 mL 为单位的色谱柱体积，r 是以 cm 为单位的色谱柱半径，L 是以 cm 为单位的色谱柱长度。

在使用后正确清洗反相 HPLC 色谱柱时，首先将您的流动相更换为 95% HPLC 级水和 5% 乙腈，然后以大约 10 倍的柱体积通过 HPLC 色谱柱以一半的流速冲洗. 这将移除任何留在 HPLC 柱中的缓冲液。然后，您可以根据需要逐步移动,将有机物含量增加到约 95% 乙腈和 5% 水，反冲洗后，将色谱柱正向连接，并在使用前与常规流动相连接。请注意，在反向冲洗色谱柱时,断开色谱柱与检测器的连接。了解如何正确反冲洗您的 HPLC 色谱柱使用这些技巧.

高效液相色谱柱存储
使用后正确存放色谱柱也很重要，尤其是要存放很长时间. 当您的 HPLC 色谱柱仍含有任何缓冲液或离子对试剂时，请务必不要将其存放起来。为确保这一点，冲洗五个柱体积s没有缓冲液的流动相通过 HPLC 色谱柱。对于具有离子对试剂的色谱柱，可能需要延长清洗时间以将它们从色谱柱中完全去除。洗完后反着放d乙腈/水 (65:35 v/v) 相色谱柱，可使用甲醇代替乙腈，正相色谱柱为 100% 己烷或 IPA，离子交换色谱柱为 100% 甲醇,和 HILIC 色谱柱，乙腈/水 (80:20 v/v)
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