液相色谱法分析食品中的霉菌毒 素

霉菌毒 素是某些真 菌产生的有害次级代谢产物，会影响广泛的农作物和食品。迄今为止，已发现并鉴定了数百种此类有毒化合物——尽管它们的毒性作用差异很大。 

大约有十几种不同的霉菌毒 素与严重的长期健康影响有关，它们由于作物或原料污染而通过食物链传播。包括液相色谱在内的各种分析技术已被证明有助于表征这些有害霉菌毒 素并确定它们在食品中的存在和浓度。

概述有害霉菌毒 素

黄曲霉毒 素、链格孢毒 素和玉米赤霉烯酮是三种霉菌毒 素，引起了全球科学和监管界的极大兴趣。这主要是由于它们对人类和牲畜的严重不 良健康影响；在暴露于癌症和免 疫缺陷等长期疾 病后不久发生急性中毒。 

除了这些健康问题外，霉菌毒 素还代表着重大的农业经济挑战。产生霉菌毒 素的霉菌几乎可以在收获前后的任何时间在食品上生长。影响霉菌生长和随后的毒 素发展的因素包括外在方面，如生长气候和储存条件。然而，复杂的内在因素也有助于霉菌生长，包括真 菌菌株特异性、菌株变异和产毒特性1的不稳定性。

从食品和农作物中提取和分析霉菌毒 素的Z佳方法是通过高效液相色谱 (HPLC) 和荧光检测进行固相萃取 (SPE)。

用液相色谱法检测霉菌毒 素

带有荧光检测的液相色谱被诊断用于分析真 菌代谢物如黄曲霉毒 素。这些常见的霉菌毒 素主要由曲霉属真 菌产生，但表现出极强的弹性，即使在霉菌被消除后也会污染食品。美国食品药品监督管理局 (FDA) 已针对各种用途的谷物和谷物中的黄曲霉毒 素水平制定了一系列行动水平，人类食用的**浓度水平为 0.5 – 20 微克/千克 (μg/kg)。
使用荧光液相色谱分析黄曲霉毒 素的潜在挑战是四种不同的黄曲霉毒 素 B1、B2、G1 和 G2 的复杂光化学行为。这使得通过液相色谱法对黄曲霉毒 素和其他相关霉菌毒 素进行高通量分析非常困难。 

通过液相色谱法测定链格孢毒 素也存在类似的挑战。这些是由一种广泛存在的真 菌物种产生的有害化合物，称为链格孢菌，主要生长在谷物和种子上。它存在于小麦、水稻甚至烟 草等多种作物上。这组霉菌毒 素表现出急性和慢性健康影响。Tenuazonic acid (TeA) 是一种特征明确的链格孢霉菌毒 素，已知可阻断负责抗 菌、抗肿瘤和抗病毒活性的蛋白质的合成。然而，与黄曲霉毒 素不同的是，目前尚无食品和原料中链格孢浓度的监管标准。

霉菌毒 素分析的独特复杂性凸显了在使用液相色谱和荧光检测时需要不同的 SPE 方法。例如，UVE 光化学反应器用于补偿黄曲霉毒 素 B1 和 G1 的低固有荧光。样品从液相色谱柱洗脱后被转移到光化学反应器中，在该反应器中，峰值波长约为 254 纳米 (nm) 的紫外光将黄曲霉毒 素 B1 和 G1 衍生化，使其发生光诱导羟基化。随后可以比较容易地基于荧光对其进行分析。

在紫外线的帮助下，也可以解开链格孢毒 素的复杂分类。紫外检测与等度液相色谱系统中的荧光检测相结合，可以在有限的样品体积和复杂的基质中表征多种霉菌毒 素。