薄层色谱法 是一种用于分离和分离本质上不挥发的混合物的色谱法。 就像其他色谱过程一样,这个过程由流动相和固定相组成。
后者是一层薄薄的吸收材料,例如氧化铝、硅胶或纤维素。 该层应用于称为惰性基材的塑料、玻璃或铝箔片。 TLC 程序中的流动相 是溶剂或其混合物。
如果您想了解有关 更多信息 薄层色谱程序的 ,那么您来对地方了。 在这里我们将讨论它的原理、过程和在不同行业中的应用。
我们将从 TLC 原理开始。
薄层色谱原理
TLC 程序的分离原理基于给定化合物对流动相和固定相的相对亲和力。 该过程从在固定相表面上移动流动相开始。 在此运动期间,与低亲和力化合物相比,高亲和力化合物获得的速度更慢。 这导致他们的分离。
程序完成后,可以在不同水平的静止表面上找到不同的点,反映混合物的各种元素。 基本上,更容易被固定相吸引的化合物将它们的位置固定在较低的水平,而其他化合物则移向表面的较高水平。 因此可以相应地看到它们的斑点。
在 TLC 原理之后,现在让我们继续其程序。
薄层色谱程序
从上面提到的信息,您必须清楚TLC的工作原理。 但是,您仍然需要了解其完整程序才能查看其全部功能。 TLC 程序中涉及的一些组件如下。
TLC 板: 这些用于施加薄层固定相。 它们本质上是惰性或稳定的。 固定相层在这些板中保持均匀,以便更好地进行分析。 通常,进行实验的人更喜欢即用型板。
流动相: 这包括溶剂(或溶剂混合物)。 所使用的溶剂必须具有化学惰性、尽可能高的纯度且无颗粒。 只有这样才能形成 TLC 斑点。
TLC 室: 这是进行薄层色谱程序的地方。 它使灰尘颗粒远离过程,并且不会让溶剂蒸发。 为了适当地开发斑点,该室内保持均匀的环境。
滤纸: 用流动相溶液润湿后放置在腔室内。 它确保流动相在整个 TLC 板的长度上均匀上升。
收集完所有这些组件后,该过程就开始了。 以下是其中的步骤:
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该过程首先用铅笔在 TLC 板的底部做一个薄标记。 它有助于样品点的应用。 这些点保持相等的距离。
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然后将样品施加到在线制作的这些点上。
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然后将流动相填充到 TLC 室底部几厘米处。
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倒入流动相后,将湿润的滤纸与腔壁内侧一起放置。 这有助于通过保持相等的湿度来避免边缘效应。
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*后,将准备好的固定相板放入腔室内。 此时,样品点保留在流动相一侧。
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然后在将板放入腔室后关闭腔室。
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一旦该过程经过足够的时间,取出板并使其干燥。
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*后,通过适合样品的方法对样品斑点进行分析,例如紫外光、KMnO4 染色和碘染色。
这样,TLC 程序就完成了。 分析完化合物后,它会以其相对迁移率的术语进行描述,即计算其 Rf 值。 即使在相同的情况下,每个化合物的该值也会发生变化。
通常,这里会使用相对 Rf,因为可能无法保持所有 TLC 因子恒定。 这些方面包括吸附剂、温度、吸附剂厚度、点状材料的数量和溶剂系统。 用于 Rf 值计算的公式为:
Rf =(样品覆盖的距离)/(溶剂覆盖的距离)
薄层色谱应用
仅仅了解TLC的原理和程序是不够的。 您还需要了解薄层色谱的用途,以了解它在现实世界中的工作方式和位置。 一些标准的 TLC 应用包括:
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作为一种分离过程,TLC 被证明对于分离由多种成分组成的药 物制剂非常有效。
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该过程可用于检查给定产品的纯度。
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局部麻醉剂、镇痛剂、镇 静剂、催眠药、抗惊厥镇 静剂和类固醇等药 物都通过 TLC 程序 进行定性测试。
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化妆品行业还使用 TLC 来检查产品中是否存在防腐剂。
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可以使用 TLC 纯化给定的化合物,然后与标准样品进行比较。
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TLC 也可用于生化分析。 在这里,它可用于从尿液、血浆、血清和体液中分离生化代谢物。
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就像化妆品行业一样,食品行业也使用 TLC 检测防腐剂、人造色素和甜味剂。
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还可以使用 TLC 跟踪反应的进度以查看它是否完成。
这些是一些典型的薄层色谱应用,您可以在不同的地方找到它们。 但是,该程序不仅 限于这些,您还可以在许多其他行业中看到它的使用。
薄层色谱的 优点和缺点
*后,让我们探讨一下使用薄层色谱程序的一些优点和缺点。
薄层色谱的优势
这些包括:
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可以毫无困难地进一步可视化 TLC 的分离点。
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与其他方法相比,该色谱过程具有成本效益。
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它可以用于许多化合物,并且不需要太多时间,因为它更快。
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这个过程比其他方法简单得多。
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TLC 使分析任何给定化合物的纯度标准变得简单。
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几种化合物可以通过 TLC 轻松分离。
TLC的缺点
该过程的缺点是:
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TLC 程序 不能用于检测下限实验,因为它具有很高的检测限。
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TLC 中使用的板不具有更长的固定相。
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结果再现在 TLC 中具有挑战性。
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TLC仅 限于定性分析,不能用于定量分析。
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与其他色谱方法相比,分离长度也受到限制。
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这里的过程不是在封闭系统中进行的。 因此,温度和湿度等方面会影响结果,使其不准确。
我们希望所有这些信息能帮助您了解有关薄层色谱概念的一切。