固相萃取小柱是一种基于色谱分离的样品前处理方法,是近年来流行且成熟的样品前处理方法。 由于SPE吸附剂具有不同的官能团,它有固相和液相之分,它可以在萃取柱上吸附和保留特定的化合物。
一、固相萃取柱的作用
1.1 分离
将目标物与大量样品基质分离,去除样品基质,同时将样品转化为仪器可接受的形式,然后才能进行仪器分析。 SPE 不仅适用于小体积样品中目标化合物的分离和基质去除,也适用于大体积样品中痕量目标化合物的富集。
1.2 净化
样品前处理的主要目的之一是去除样品中干扰仪器或分析的成分或杂质。
1.3 溶剂开关
SPE 不存在乳化问题,有机溶剂和水相之间不存在直接相互作用。
目前在线组合 主要有两种方式 SPE柱:
一种是用切换阀连接萃取柱和色谱分析柱,让色谱流动相将萃取柱上富集的样品全部转移到色谱分析柱(直接法)。
另一种是间接法,采用与离线固相萃取相同的纯化方法。 样品组分采集完毕后,用萃取器的内置进样器取10-20微升组分注入色谱分析柱。
2. 类型
有多种类型固相萃取柱。在具体的实验工作中,要根据分析对象、检测方法和实验室条件,合理选择合适的填料和合理规格的固相萃取柱。
考虑固相萃取柱对分析对象的萃取能力、样品溶液的体积、洗脱后溶液的*终体积以及样品溶液中分析物和干扰物的总量。 目前主要应用于食品**领域,如各种食品中各种抗 生素、抗 菌药 物的残留分析; 农产品农药残留分析; 各种食品中合法和非法添加剂的分析。
在药 物研究领域,广泛应用于药 物药代动力学、药代动力学分析和中药分析。 在环保领域,固相萃取小柱用于环境中的多环芳烃(PAHs)、PCBs和各种农药的分析; 以及分析饮用水、地下水和污水中的有机物质。
常见的固相萃取柱多为聚乙烯制成的注射器式装置。 该装置装有两个聚丙烯或玻璃纤维制成的塞子,在两个塞子(填料)之间填充一定量的色谱吸附剂。 SPE小柱上端开口,下端为出液口,液体通过该出液口排出。
根据经典固相萃取柱填料上方的空间容积,规格可分为60ml、30ml、20ml、15ml、10ml、6ml、3ml、1ml。 还有根据特定应用要求生产的特殊 SPE 小柱。 从固相萃取柱的外观来看,经典的固相萃取柱类似于注射器,是直的。
3. 准备工作
固相萃取仪使用前的准备工作如下:
3.1 柱前处理
使用前,SPE 小柱需要用合适的溶剂进行预处理,以去除填料中可能存在的杂质。 这样做是为了实现良好的重现性和高回收率。 另一个目的是溶解填料并提高重现性。
3.2 样品的添加
预处理后的样品溶液以一定的流速加入并通过色谱柱。 在该步骤中,分析物保留在吸附剂上。
3.3 洗柱
当样品通过萃取柱时,不仅分析物被吸附在柱上,同时还有一些杂质被吸附。 选择合适的溶剂来洗脱干扰组分,同时将分析物保留在色谱柱上。
3.4 分析物的洗脱
使用洗脱液洗脱收集管中的分析物。 为了提高待测物浓度或调整溶剂杂质以备后续分析使用,可将收集到的待测物积分并用氮气吹干,然后溶解在少量合适的溶剂中。