如何计算柱效、峰不对称因子、拖尾因子和分离度？

柱效计算

柱效以每根柱子的理论塔板数表示，计算公式为 N = 5.54 ( t _R / w _0.5 ) ² 其中 t _R 是目标分析物的保留时间，w _0.5 是半峰高处的峰宽.

即使峰没有与相邻峰完全分离（分辨率差），只要峰之间的谷值低于半峰高，这种半峰高方法也可以确定每根色谱柱的理论塔板数 (N)。峰的高度。 半高测量通常是数据系统自动确定的首 选方法。

每根柱子的理论塔板数越大，峰越尖！ 如果您需要计算每米的理论塔板数，则必须使用以下公式：

每根色谱柱的理论塔板数 x 100/HPLC 色谱柱长度 (cm)= 每米理论塔板数

峰值不对称因子

峰不对称因子，通常表示为 A _s 使用以下等式计算 A _s = b/a 其中 b 是从峰中点（ 与峰*高点垂直 ）到峰后缘的距离，在 10% 处测得峰高，a 是在 前缘到峰中点（ 峰高的 处 从峰 与峰*高点垂直）的距离 10% 测得的 。

拖尾因子

解析度

分辨率 (R _s ) 是分离质量的量度。 为了确定 2 个峰之间的分离度，我们需要测量 2 个目标峰（t 的保留时间以及 _r2 和 t _r1 ） 在基线处的两个峰的宽度（w ₁ 和 w ₂ ）。峰的两侧。 通常计算如下：

R _s s = (t _r2 – t _r1 ) / ((0.5 * (w ₁ + w ₂ )

由于几乎每个峰都显示出一定程度的拖尾，因此为了允许少量拖尾并在峰之间仍然保留一点平坦的基线， R _s 通常需要 ≥ 2.0 以在两个感兴趣的峰之间获得适当的分辨率。

该方程非常方便，并为峰分辨率计算提供了良好的结果，但仅当峰在基线水平上分辨时才有用。 但是，我们经常会遇到峰之间相距很小的情况。 峰在底部重叠，在基线处测量峰宽几乎是不可能的。

在这些情况下，就像我们在中间峰高处测量效率一样，可以使用相同的方法通过以下等式计算分离度：

R_s = (t_R2 – t_R1) / ((1.7 * 0.5 (w_0.5,1 + w_0.5,2))

其中w _0.5,1 和w _0.5,2 是在峰值高度一半测得的峰值的宽度。 请注意，将因子 1.7 添加到分母以调整半高处的宽度差异。 半高技术是许多数据系统测量分辨率的方式，因为它比基线宽度更容易测量。

每根色谱柱的理论塔板数（性能）/对称因子/拖尾因子/分辨率可以并且将会根据所使用的分析类型和分析条件而变化。