HPLC中常见的异常峰型及其与HPLC色谱柱的关系

在HPLC分析过程中，由于各种原因，经常会出现一些异常峰形，严重影响分析结果，给实验者带来很大的困扰。在这里介绍了一些常见的峰形状和可能的原因，我们将了解它们是否与HPLC柱有关。

1、无峰值
可能的原因：
a、进样不成功，或样品未溶解在溶剂中，或样品分解变质或样品浓度过低；
b、液相色谱仪本身的问题：泵或检测器故障；
C、流动相选择不当。比如反相硅胶柱，如果流动相极性太大，一些小的极性物质就洗不掉，这些物质残留在柱子里，就不会出峰；
d、探测器不合适。例如，有些产品没有紫外线吸收或吸收很弱，但使用紫外线检测器进行检测。

2、平头峰
可能的原因：
a、样品浓度过大或进样量过大，也是主要原因；
b、液相色谱的检测器设置不正确。

3、负峰
可能的原因：
a、流动相吸收背景值过高；
b、采样过程中有空气进入；
C、样品组分的吸收低于流动相的吸收；
d、所制备样品的溶剂与流动相不一致。

4、肩峰
可能的原因：
a、进样量过大，样品浓度过高；
b、保护柱或柱头堵塞；
C、保护柱或色谱柱被污染或失效；
d、柱头塌陷。

5、分叉峰
可能的原因：
a、溶剂效应：用于溶解样品的溶剂与初始流动相的极性相差太大；
b、保护柱或柱头堵塞；
C、保护柱或色谱柱被污染或失效；
d、柱头塌陷。

6.鬼峰
可能的原因： 鬼峰出现在某个光谱中，做同样的条件后可能不会再出现。有时没有峰值。
a、对于进样阀的残留峰，每次进样后要花足够的时间平衡和清洁系统；
b、样品中存在未知物，改善样品的前处理；
C、如果流动相被污染，更换新的流动相（或更换品牌）；尽量准备现用，再次使用时过滤过夜流动相；
d、流道内有小气泡，打开吹扫阀增加流量消除。

7、凸峰
可能的原因：
a、进样量或样品浓度高；
b、溶解样品的溶剂比流动相极性更大；
C、保护柱或色谱柱被污染或失效；
d、如果流动相不合适，更换新的（调整pH值或改变类型、比例等）。

8、拖尾峰
可能的原因：
a、进样量或样品浓度高；
b、如果流动相不合适，更换新的（调整pH值或改变类型、比例等）；
C、硅烷醇作用：加入三乙胺，用碱诱导钝化柱增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相的pH值，钝化样品；
d、柱内烧结不锈钢失效：更换烧结不锈钢，增加在线过滤器，过滤样品；
e、柱头塌陷或柱效降低：更换色谱柱。