气相色谱法和高效液相色谱法都是分离技术,在学术和工业实验室都得到了广泛的应用。高效液相色谱法在医药、食品、生命科学和聚合物等领域得到了广泛的应用,而气相色谱法在石油和石化工业、香精和香料以及环境空气监测等领域有着重要的应用,。您脑海中出现的一个普遍问题是HPLC和GC有何不同,以及哪些因素决定了两者的适用性。
流动相
顾名思义,高效液相色谱法使用液体流动相,气相色谱法使用气体作为载体。液体通常是相容极性溶剂的混合物,而在气相色谱中,流动相是单一的高纯度气体。
工作温度
HPLC分离主要在环境温度下进行,而气相色谱分离则在高温下进行,高温可保持在恒定值(等温)或由温度程序决定的变量。新型填料也扩展了高效液相色谱操作的温度限制。 化合物的性质
气相色谱分离主要对分子量高达数百的化合物进行。这些化合物根据其挥发性的不同而分离,并在高温下保持稳定。另一方面,对于大聚合物和生物分子,通过HPLC分离的化合物具有较高的分子量,从数百到数百万不等。这种化合物只能在室温下进行分析,因为在高温下它们容易降解。
柱尺寸
与气相色谱中使用的气体相比,HPLC中用作载体的液体通常具有更高的粘度。这导致HPLC中柱背压增加。正是由于这个原因,与GC柱相比,高效液相色谱柱更短,直径更大,GC柱更长、更窄。增加色谱柱长度可提高密集峰之间的分辨率。随着分析速度的加快,用于HPLC的色谱柱长度短至1厘米。
柱填料
与气体相比,柱填料对液体流动的阻力更大。气体也比液体具有更高的固体载体渗透性。HPLC柱的保留模式取决于极性差异或分子大小,而GC分离基于化合物挥发性的差异检测原理
HPLC检测通常基于无损检测,如UV、RI、光电二极管阵列检测器、电导率和激光检测。另一方面,气相色谱检测主要基于破坏性原理,如FID、NPD和FPD。LC和GC共有的质谱检测器本质上是破坏性的。
运营成本
与用于GC分析的气体相比,HPLC溶剂成本较高。除溶剂成本外,由于泵和色谱柱中产生的高压,高效液相色谱系统的维护成本也较高。相比之下,气相色谱分析成本更低,维护成本更低。
高效液相色谱法和气相色谱法都是多用途的,它们的应用范围不断扩大。LC–MS–MS和GC –MS–MS等串联技术将检测限扩展到检测和自动化的新领域,也有助于提高实验室通量。
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