HPLC和UHPLC色谱柱的7个误区

由于高效液相色谱具有速度快、分离效果好、灵敏度高等优点，因此应用越来越广泛。 HPLC色谱柱是HPLC系统的重要组成部分。 使用时需谨慎使用，使用后必须进行保养，以免下次使用出现问题。 色谱柱的频繁更换是非常昂贵的，因此为了节约成本，需要更大程度的延长色谱柱的使用寿命。 同时，必须小心维护色谱柱，以保持每次获得结果时的准确性和一致性。 广州绿百草编辑总结了7个关于色谱柱的误区，希望能延长使用寿命。

误区一：HPLC色谱柱不能反吹

一般情况下， 液相色谱柱的设计耐压值远高于ZUI大工作压力。更换柱子时，反吹可以清 除柱头一些吸附性强的物质，我们把这些残留的物质冲掉，防止压力升高。但是如果你买的色谱柱在柱头使用大粒径填料，反吹时这部分填料会被冲掉。因此，在选择是否反吹之前，您必须检查您使用的液相色谱柱。

误区二：所有C18列都一样

在早期的HPLC系统中，C18是标准反相色谱的键合固定相，因此C18被用作反相色谱柱的标准。然而，时代不会停滞不前。人们对科学的追求和认识越来越深刻，出现了更多的固定相，许多C18色谱柱也诞生了 。虽然也使用硅胶作为基质，但各有其特定的填料键合合成工艺，因此色谱性能不同。所以仅仅因为名称都是C18列，认为性能是一样的是错误的。

误区三：空气一旦进入色谱柱就会损坏

我们都知道，当色谱柱没有连接到色谱仪时，要保证色谱柱密封严密。 但在实际应用中，即使有少量空气进入色谱柱末端，也不是什么大问题。色谱柱与色谱仪连接使用时，在系统初始加压过程中，空气会在短时间内被溶剂挤出。因此，不要仅仅因为少量空气进入色谱柱就认为色谱柱已损坏。

误区四：不需要保护柱

事实上，使用保护柱有很多优点。高效液相色谱的流动相中常使用各种试剂，其中混有一些不溶或不纯的物质。大多数不溶物可以通过用筛子或膜过滤器过滤流动相来去除，但不能完全过滤非常细的颗粒。另外，流动相调制后，不溶、不纯的物质有可能通过空气、容器、人体等落下，这些不溶、不纯的物质会污染色谱柱、堵塞色谱柱，或对色谱柱产生**影响。对分析的影响。

此时，通过在色谱柱前安装分析保护柱，可以防止其产生，保护色谱柱。与更换昂贵的分析柱相比，添加或更换保护柱只需很少的费用。液相色谱保护柱几乎没有死体积，更换方便。适用于UHPLC系统的高压，截留那些强保留且不可吸附的化合物。样品和流动相的过滤可以保持保护柱对化学污染物的吸附能力，更长时间地保持柱效，延长色谱柱的使用寿命。

误区五：反相色谱柱不能使用纯水相

当使用低有机溶剂含量或纯水作为反相色谱柱的流动相时，一些色谱工作者会遇到相塌陷。因此，有人认为反相色谱柱不能使用纯水。但实际上，市面上销售的反相色谱柱（如极性包埋柱和极性封盖柱）都是亲水性的，其表面特性允许使用纯水，不会造成塌陷或保留时间偏移。

误区六：粒径越小，柱填料压力越高，分离效果越好

色谱柱的性能不能仅仅通过填料是否超小粒径和超高柱压来评价。现代对色谱柱柱特性的研究越来越深入，已经开发出一些提高色谱柱效率的方法。例如，新型表面多孔材料色谱柱的柱效与亚 2µm UHPLC 色谱柱一样好。与传统色谱柱相比，它的柱压非常低。

误区七：柱压不会影响色谱分离效果

近年来，柱压问题引起了众多色谱工作者的关注。色谱图的很多参数受柱压影响，包括一些溶质的摩尔体积、滞留体积、柱孔隙率、保留因子和流动相等。如果在13.789MP的压力下操作色谱柱，即使保留时间差异很小。但是，当柱压接近2000psi（13.789MPa）时，柱压的影响可能比较明显。

结论 近几十年来，高效液相色谱已广泛应用于生命科学、药 物分析、食品分析、环境监测等领域。人们对液相色谱的不断研究也产生了更多的液相色谱应用、解决方案和方法等，相信未来液相色谱的应用领域会更加广阔。