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理想的进样体积与色谱柱尺寸

进样体积与色谱柱的柱体积直接相关,因此取决于色谱柱的横截面积 (A=π r2) 和长度 (L)。

因此,您可以根据现有的进样量方法估计任何调整。 如果您要转换为不同的内径( 具有相同的包装材料和长度 ),只需将当前体积乘以半径平方的比率即可确定新方法的正确体积。 进样量和zui佳流速受色谱柱内径的限制。 理想情况下,对于不同的柱长,您的样本量应该是:

色柱内径 体积 (µL)
2.1 mm(30 -100 mm) 1-3<
3.0-3.2 mm(50-150 mm) 2-12
4.6 mm(50-250 mm) 8-40
10 mm(50-250 mm) 40-100
21.2 mm(50-250 mm) 150-300
30 mm(50-250 mm) 300-700
50 mm(50-250 mm) 1000-2000

如果峰仍然对称,则可以接受更大的体积。如果体积过大,较早的洗脱峰将首先展宽。

如果样品中的溶剂比流动相强(如果使用梯度则为起始比率 ),则需要使用较小的体积。

同样,如果您的样品溶剂比流动相弱,您可以使用更大的体积。

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